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三、液固吸附色譜法 LSC
l 分離原理:按被分離組分的分子(溶質(zhì)分子)與流動(dòng)相分子(溶劑分子)爭奪吸附劑表面活性中心的吸附能力的差別而分離。
l 硅膠為吸附色譜法最常用的固定相。
四、液液分配色譜法 LLC
(一)正相分配色譜法:流動(dòng)相極性<固定相極性。
主要用于分離溶于有機(jī)溶劑的極性及中等極性的分子型物質(zhì)。
反相分配色譜法:流動(dòng)相極性>固定相極性。主要用于分離非極性至中等極性物質(zhì)。
(二)LLC的固定相 最常用的固定相是化學(xué)健合相。
(1)非極性健合相:十八烷基硅烷健合硅膠(ODS,C18)、辛基硅烷健合硅膠(C8),在反相HPLC中最為常用。
(2)極性健合相:常用氨基和氰基硅烷鍵合相,即可用于正相色譜法,也可用于反相色譜法。多用于正相HPLC。
★★五、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
目的:檢查色譜系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)條件影響下是否符合要求
在各品種項(xiàng)下規(guī)定的色譜條件下,除固定相種類、流動(dòng)相組成、檢測器類型不得改變外,其余如色譜柱內(nèi)徑、色譜柱長度、固定相牌號(hào)、載體粒度、流動(dòng)相流速、混合流動(dòng)相各組成的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當(dāng)改變。以適應(yīng)具體的色譜系統(tǒng)并達(dá)到色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。
一、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)通常包括:理論踏板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個(gè)指標(biāo)。
(1)色譜柱的理論踏板數(shù)(n) n=5.54 (tR /Wh/2)2 tR, Wh/2統(tǒng)一單位
如測得n低于規(guī)定,應(yīng)改變柱長或載體性能、重填色譜柱等以求達(dá)到。
(2)分離度 (R) R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) 定量分析時(shí)R 3 1.5
記錄紙速:轉(zhuǎn)換分子、分母單位相同的參數(shù)。
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(責(zé)任編輯:中大編輯)
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