第二節(jié) 體內(nèi)樣品處理

體內(nèi)樣品處理的常用方法

(1)去除蛋白質(zhì)法

釋放與蛋白結(jié)合的藥物，測定總濃度，還可保護儀器不被蛋白污染。

①蛋白沉淀法

有機溶劑(按照1：(1~3)比例加入：乙腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃

強酸(按照1：0.4)比例加入：10%三氯醋酸、7%高氯酸、5%偏磷酸

無機鹽(血樣和無機鹽以1:2混合)：飽和硫酸銨、硫酸鈉、鎂鹽、磷酸鹽

②蛋白分解法 測定某些與蛋白結(jié)合牢固、且對酸不穩(wěn)定的藥物時，需用酶解法使蛋白分而釋放出藥物。

(2)綴合物水解法

常用的綴合物水解法包括酸水解和酶水解。

酸水解：簡便、快速、但是專屬性差，并需避免藥物的進一步降解。

酶水解：時間長，酶試劑帶入的粘液蛋白可能污染色譜柱，但是具有選擇性較高的特點，常被優(yōu)先選用。

(3)萃取分離法

1. 液—液萃取法

大部分藥物有親脂性，在弱極性的有機溶劑中的溶解度大于在水中的溶解度。常用有機溶劑

除去大部分的內(nèi)源性干擾。所選有機溶劑與水不相容、低毒性、對被測組分有較大溶解度。

常用的有乙酸乙酯、乙醚、三氯甲烷、甲基叔丁基醚等。

優(yōu)點：操作簡便、選擇性好、去除內(nèi)源性物質(zhì)干擾能力強，因為被廣泛使用。

2. 固相萃取法

與高效液相色譜柱類似，利用柱色譜的分離方法，將具有吸附、分配或離子交換性質(zhì)的的大

比表面積吸附填料作為萃取劑填成小柱，將體內(nèi)樣品通過小柱，微量待測組分被保留，而內(nèi)

源性干擾物質(zhì)大多不被保留而通過，用淋洗溶劑進一步洗去干擾物后，在用洗脫溶劑將藥物

洗脫收集。適用于基質(zhì)中的酸性、堿性和中性樣品的凈化與分離。

(4)化學(xué)衍生化法

根據(jù)待測物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和檢測方法的要求，通過化學(xué)衍生物法，特異性的引入功能基團后再

進行分析。通常對藥物分子中含有活潑H的極性基團，如含COOH--、--OH、--NH2、--NH—

和—SH，進行化學(xué)衍生化。目的是：改變待測藥物的色譜行為，增強藥物的穩(wěn)定性，改善

分離能力(手性拆分)，提高檢測靈敏度

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（責(zé)任編輯：中大編輯）

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