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黃酮類化合物的提取分離

一、提取

黃酮苷和極性較大的苷元：甲醇，乙醇，甲醇-水(1：1)，丙酮，乙酸乙酯。

多糖苷：沸水

花色苷：0.1%鹽酸進行提取。

苷元：氯仿，乙醚，乙酸乙酯。

注意：苷類提取防止酶解。

(一)溶劑萃取法：自浸膏中先用乙醚萃取苷元，再用乙酸乙酯反復(fù)萃取苷，最后用正丁醇萃取極性較大的苷。

(二)堿提酸沉法

(1) 常用堿水：石灰水，Na2CO3，稀NaOH，堿性稀醇。

酸沉：鹽酸

注意：酸堿濃度不宜過高。

堿性過強，破壞黃酮母核;酸性過強，生成佯鹽，影響產(chǎn)率。

石灰水：可除去鞣質(zhì)，果膠，粘液質(zhì)，有利于純化。但浸出效果不及NaOH ，且有些黃酮可與鈣結(jié)合成不溶性沉淀。 稀NaOH：浸出效率高，但雜質(zhì)多。

二、分離方法

分離的基本依據(jù)：

極性差異、酸性強弱、分子大小和特殊結(jié)構(gòu)。

(一)柱色譜法

1、硅膠柱色譜法

適于分離異黃酮，二氫黃酮(醇)和高度甲基化或乙酰化的黃酮及黃酮醇類。

分離苷元時：氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。

分離苷時：氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水

2、聚酰胺柱色譜

適于黃酮類化合物的分離。

規(guī)律：

A：苷元相同時，以含水移動相洗脫，被吸附的強弱順序為： 苷元>單糖苷>雙糖苷>雙糖鍵苷。

B：與酚羥基的數(shù)目有關(guān)，數(shù)目越多，吸附力越強。與酚羥基的位置有關(guān)，如果酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱。

查耳酮>二氫黃酮， 黃酮>二氫黃酮

C：不同類型黃酮類化合物，被吸附的強弱順序為：黃酮醇>黃酮>二氫黃酮>異黃酮。

D：分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附力越強。

3、葡聚糖凝膠色譜法

凝膠類型：Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類型的凝膠。

分離苷元時：利用吸附作用，游離酚羥基數(shù)目越多，則吸附力越強，越難洗脫。

分離苷時：主要靠分子篩，洗脫時按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。

黃酮類化合物 取代基 Ve/Vo

芹菜素 5，7，4‘-三羥基 5.3

木犀草素 5，7，3‘，4’-四羥基 6.3

槲皮素 3，5，7，3'，4'-五羥基 8.3

楊梅素 3，5，7，3‘，4’，5‘-六羥基 9.2

山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3

半乳糖-7-鼠李糖苷

槲皮素-3-蕓香糖苷 雙糖苷 4.0

槲皮素-3-鼠李糖苷 單糖苷 4.9

常用的洗脫劑：堿性水溶液，含鹽水溶液、醇及含水醇

(二)PH梯度法：用不同濃度的堿分離

(三)硼酸絡(luò)合法 具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡(luò)合生成易溶于 水的化合物。

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（責任編輯：中大編輯）

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