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顯微制片方法
顯微鑒定法是利用顯微鏡來(lái)觀察藥材的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀及內(nèi)含物的特征、礦物的光學(xué)特性,和用顯微化學(xué)方法,確定細(xì)胞壁及細(xì)胞內(nèi)含物的性質(zhì)或某些品種有效成分在組織中的分布等,用以鑒別藥材的真?zhèn)闻c純度甚至品質(zhì),以及對(duì)中成藥是否按處方規(guī)定投料進(jìn)行鑒定。
顯微制片方法:有橫切片或縱切片、表面制片、粉末制片、解離組織片、花粉粒與孢子制片、礦物藥磨片和粉末中成藥片等方法。其中,制作解離組織片 時(shí),如樣品中薄壁組織占大部分,木化組織少或分散存在,可用氫氧化鉀法;如果樣品堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。礦物藥因特 別堅(jiān)硬,要進(jìn)行顯微鑒別,必須用一定的設(shè)備按一定的工序?qū)⒌V物磨制成0.03mm厚的薄片后制片,然后根據(jù)鑒定對(duì)象不同的光學(xué)性質(zhì)選用透射光源或反射光源 的偏光顯微鏡進(jìn)行鑒定。
顯微化學(xué)鑒定法
1.細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別
(1)木質(zhì)化細(xì)胞壁:加間苯三酚試液1~2滴,稍放置,加鹽酸l滴,因木化程度不同,顯紅色或紫紅色。
(2)木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁:加蘇丹Ⅲ試液,稍放置或微熱,顯橘紅色至紅色。
(3)纖維素細(xì)胞壁:加氯化鋅碘試液,或先加碘試液濕潤(rùn)后,稍放置,再加硫酸溶液(33→50),顯藍(lán)色或紫色。
(4)硅質(zhì)化細(xì)胞壁:加硫酸無(wú)變化。
2.細(xì)胞內(nèi)含物性質(zhì)的鑒別
(1)淀粉粒:①加碘試液,顯藍(lán)色或紫色。②用甘油醋酸試液裝置,置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的淀粉粒顯偏光現(xiàn)象;已糊化的無(wú)偏光現(xiàn)象。
(2)糊粉粒:①加碘試液,顯棕色或黃棕色。②加硝酸汞試液,顯磚紅色。
(3)脂肪油、揮發(fā)油或樹(shù)脂①加蘇丹Ⅲ試液,顯橘紅色、紅色或紫紅色。②加90%乙醇,脂肪油不溶解(蓖麻油及巴豆油例外),揮發(fā)油則溶解。
(4)菊糖:加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸,顯紫紅色并很快溶解。
(5)黏液:加釕紅試液,顯紅色。
(6)草酸鈣結(jié)晶:①加稀醋酸不溶解,加稀鹽酸溶解而無(wú)氣泡發(fā)生。②加硫酸溶液(1→2),逐漸溶解,片刻后析出針狀硫酸鈣結(jié)晶。
(7)碳酸鈣結(jié)晶(鐘乳體):加稀鹽酸溶解,同時(shí)有氣泡發(fā)生。
(8)硅質(zhì):加硫酸不溶解。
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